iDISCO:一种简单,快速的方法,用于对体积成像的大型组织样本进行免疫标记
Nicolas Renier1, Zhuhao Wu1, David J Simon1
1Laboratory of Brain Development and Repair, The Rockefeller University, 1230 York Avenue, New York, NY 10065, USA.
Cell
|November 24, 2014
概括
我们开发了iDISCO,这是一种快速而实惠的方法,可以对整个器官和胚胎进行3D成像. 这种技术允许在大,清除的组织中详细可视化分子结构,有助于神经生物学研究.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 大型组织中分子标记结构的3D可视化具有挑战性.
- 现有的方法往往是复杂的,耗时的或昂贵的.
研究的目的:
- 推出iDISCO,一种简单,快速和廉价的方法,用于整体免疫标记和大规模清除生物样本的3D体积成像.
- 为了证明iDISCO与各种抗体和转基因报告者的兼容性.
- 应用iDISCO来分析复杂组织中的神经元退化.
主要方法:
- 关于整体免疫标记和组织清除的iDISCO协议.
- 清除样本的体积成像 (围产期小鼠胚胎,成年器官如大脑和脏).
- 使用28种抗体和绿色光蛋白 (GFP) 报告者的兼容性测试.
主要成果:
- iDISCO成功启用了各种大型组织的全免疫标记和3D体积成像.
- 该方法与广泛的抗体相兼容,包括针对内源抗原和转基因记者的抗体.
- 对退化的神经元的应用揭示了亡神经元数量的意想不到的变异性,并允许在体内可视化单个退化的轴突和分裂的Caspase-3.
结论:
- iDISCO是一种有效且可访问的技术,用于复杂组织中免疫标记结构的3D成像.
- 该方法有助于研究完整的器官和胚胎中的细胞和亚细胞结构.
- iDISCO为神经元退化过程提供了新的见解.


