实用表征策略用于比较,资格和选择细胞活力检测方法用于细胞治疗产品的开发和制造
Yongyang Huang1, Rachel Watkins2, Samir Patel3
1Revvity Health Sciences, Inc., 360 Merrimack St., Suite 200, Lawrence, MA, 01843, USA. yongyang.huang@revvity.com.
Journal of fluorescence
|September 22, 2023
概括
本研究介绍了比较细胞活力测试,酸/酸 (AO/PI) 和酸/4的策略.
科学领域:
- 细胞疗法是一种细胞疗法.
- 生物技术是生物技术.
- 质量控制 质量控制 质量控制
背景情况:
- 细胞疗法开发需要对治疗产品进行强有力的质量控制.
- 国际标准化组织 (ISO) 提供了关键质量属性 (CQA) 的指导.
- 细胞计数和活力是关键的CQA,但没有标准化的方法存在于细胞活力测试选择.
研究的目的:
- 介绍特征和比较阿克里丁/酸 (AO/PI) 和阿克里丁/4',6-二胺-2-二英 (AO/DAPI) 染色方法的策略.
- 评估细胞活力测量的可比性,并确定差异的原因.
- 为了使细胞治疗产品开发能够选择适合目的的细胞活力检测方法.
主要方法:
- 使用热杀死 (HK) 和低温/缺乏营养 (LT/ND) 细胞死亡模型进行AO/PI和AO/DAPI染色的比较.
- 研究染色时间效应和线性分析,使用不同的活细胞/死细胞混合物.
- 使用长期细胞增殖试验验的活力测量的验证.
- 在抗生素选择的转化Jurkat和THP-1细胞上进行功能基因组学查的实际应用.
主要成果:
- 在不同的细胞死亡诱导条件下,对AO/PI和AO/DAPI方法进行了表征和比较.
- 对这两种方法的染色时间和细胞混合物线性进行了评估.
- 活力测量与长期扩散试验进行了验证.
- 实践比较证明了针对特定查应用的方法选择.
结论:
- 提出的策略允许对细胞活力检测方法进行适当的表征,比较和选择.
- 这项工作解决了关于合格和选择适合目的细胞活力测试的指导缺乏的问题.
- 有效的方法选择对于可靠的细胞治疗产品开发和制造至关重要.
