将差异性离子移动性分离扩展到MegaDalton范围
Tobias P Wörner1, Hayden A Thurman2, Alexander A Makarov1,3
1Thermo Fisher Scientific, Hanna-Kunath Strasse 11, Bremen 28199, Germany.
高清场非对称离子移动性谱学 (FAIMS) 与先进的质谱学相结合,现在可以分析大达尔顿生物分子组件. 这一突破使得研究大型蛋白质复合物和病毒的研究成为可能,这些研究以前超出了分析范围.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 离子移动性分离 (IMS) 和质谱学 (MS) 已经在分析较大的生物分子方面取得了进展.
- 电子喷雾电离 (ESI) 和本地MS可分析高达100kDa的蛋白质和高达10MDa的复合体/病毒.
- 差分FAIMS提供直角分离,但仅限于300kDa以下的离子.
研究的目的:
- 将高清FAIMS与高容量的轨道飞行器质谱仪 (Q-Exactive Orbitrap UHMR) 集成在一起.
- 扩大FAIMS分析对非常大的生物分子组件的质量范围.
- 为了证明在本地ESI制度中分析大达尔顿 (MDa) 离子的能力.
主要方法:
- 高分辨率FAIMS与Q-Exactive Orbitrap UHMR质谱仪的整合.
- 利用原生ESI来电离大型生物分子.
- 单克隆抗体阿达利穆马布 (148 kDa) 的尺寸选择的小分子.
主要成果:
- 成功分析了阿达利穆马布的非氨基 (1.34 MDa),其质量到电荷 (m/z) 高达 ~ 17,000.
- 在FAIMS过程中证明了非共价MDa组件的生存和有效分离.
- 在UHMR质谱仪处理的离子与m/z高达80,000和MDa大小的离子.
结论:
- 高清FAIMS与Q-Exactive Orbitrap UHMR相结合,可以分析最重的宏分子.
- 这一技术进步为研究大型非共价生物分子组件开辟了新的途径.
- 扩大IMS/MS的范围,用于描述复杂的生物系统.
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