基于井板的局部化电解工作流程,用于快速优化细胞内传递
Cesar A Patino1, Sevketcan Sarikaya1, Prithvijit Mukherjee1,2
1Department of Mechanical Engineering, Northwestern University, Evanston, IL, USA.
Bio-protocol
|August 5, 2024
概括
本研究介绍了一种高通量局部电穿孔装置 (LEPD) 和深度学习分析,用于优化蜂传输参数. 这种方法提高了效率,并减少了细胞工程中各种分子载荷的毒性.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
- 生物工程是生物工程.
背景情况:
- 对生物研究和细胞工程来说,分子的有效和安全的细胞内传递至关重要.
- 优化电穿孔参数 (电压,持续时间,缓冲区,载荷度) 是必不可少的,但对于每个应用程序来说都是复杂的.
- 目前的方法缺乏快速参数优化的高吞吐量能力.
研究的目的:
- 介绍一个高通量多井局部电穿孔装置 (LEPD) 的协议.
- 整合基于深度学习的图像分析,以快速优化分子传递参数.
- 为了使各种分子载荷能够有效且无毒地传递到各种细胞类型中.
主要方法:
- 制造和使用一种新的多井局部电穿孔装置 (LEPD).
- 实现深度学习算法,用于自动化图像分析和参数优化.
- 在不同的电穿孔条件和分子载荷 (DNA,RNA,蛋白质) 中进行多重组合实验.
主要成果:
- 该LEPD促进了电穿孔参数的高通量,复合优化.
- 集成的深度学习分析能够快速识别最佳条件,以实现高效和无毒的交付.
- 工作流程可以适应附着和悬浮细胞类型以及各种分子载荷.
结论:
- 与深度学习相结合的LEPD为加速细胞工程工作流提供了一个强大的工具.
- 这种方法显著提高了细胞内分子输送的效率和安全性.
- 本协议具有多功能性,适用于广泛的基于细胞的应用,包括生物制造和治疗.
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