一个排列的CRISPR屏幕识别了淘汰组合,提高了HEK293细胞中的抗体生产力
Eric Edward Bryant1,2, Danyang Gong2, Cai Guo2
1Amgen R&D Postdoctoral Fellows Program, Thousand Oaks, California 91320, United States.
ACS synthetic biology
|February 27, 2025
概括
破坏哺乳动物细胞中的HIST2H3C和INHBE基因显著增加了抗体和多种生物生产标位. 这种宿主细胞工程策略增强了生物制药开发的蛋白质表达.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 生物加工是一种生物加工.
背景情况:
- 哺乳动物细胞,就像人类胚胎293 (HEK293) 细胞一样,对于生产复杂的生物物质,如多种类型抗体至关重要.
- 这些生物制剂的高表达度和纯度在生产过程中可能具有挑战性.
研究的目的:
- 为了研究细胞对抗体和多种特异性表达的反应.
- 确定宿主细胞工程的遗传点,以改善生物生产.
主要方法:
- 大量RNA测序 (RNA-seq) 在表达五种不同分子的HEK293细胞上进行.
- 进行了数组的CRISPR淘汰屏幕,针对差异表达的基因和文献激励的候选人.
- 确定和验证了影响抗体生产力的淘汰目标.
主要成果:
- 观察到分泌和蛋白质折叠应力的差异性表达特征,与较低的标位相关.
- 确定了8个新的淘汰目标,使表达度增加了20%至80%.
- 在HIST2H3C和INHBE的淘汰中,表现出显著的标位增加和附加性,甚至在难以表达的抗体中高达100%,而不影响纯度.
结论:
- 破坏HIST2H3C和INHBE代表了一种新的宿主细胞工程策略,以提高抗体和多特异性生产力.
- 这些发现可以对不同的HEK293宿主和多种特异性生产系统进行概括.
- 这种方法有望提高生物制药制造效率.
