Un ensayo de aptámero fluorescente ratiométrico basado en la amplificación RCA mult-G-cuadruplex

Área de la Ciencia:

• La bioquímica
• Química analítica
• Biología molecular

Sus antecedentes:

• Los ensayos de detección de una sola señal son propensos a falsos positivos.
• La aflatoxina B1 (AFB1) es un contaminante importante de los alimentos que requiere métodos de detección precisos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un ensayo ratiométrico para la detección de la aflatoxina B1 (AFB1).
• Aprovechar las señales de fluorescencia dual para mejorar la especificidad del ensayo y reducir los falsos positivos.

Principales métodos:

• Diseñó un ensayo de doble señal utilizando la unión de aptamer-AFB1 y las interacciones de la cadena de ADN.
• La fluorescencia de la FAM (6-carboxifluoresceína) utilizada se apagó después de la unión de AFB1 al aptamer.
• Fluorescencia de la N-metilmesoporfirina IX (NMM) incorporada, dependiente de la alteración de la estructura del cuadruplejo G.

Principales resultados:

• La unión de AFB1 al aptamer liberó una hebra complementaria, interrumpiendo la estructura G-cuadruplex.
• La interrupción del G-cuadruplex impidió la intercalación del tinte NMM y la emisión de fluorescencia.
• Se estableció una señal ratiométrica basada en la intensidad de fluorescencia FAM y NMM para la detección de AFB1.

Conclusiones:

• El ensayo ratiométrico de señal de fluorescencia dual desarrollado ofrece un método fiable para la detección de AFB1.
• Esta estrategia proporciona un enfoque prospectivo para la construcción de ensayos de relación de doble señal para varios analíticos.