纳米BRETTM活细胞激酶选择性剖析适用于高通量选.
Amanda N Nieman1, Kaitlin K Dunn Hoffman1, Elizabeth R Dominguez1
1Promega Corporation, Madison, WI, USA.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|August 9, 2023
概括
这项研究增强了使用自动化和声学分发的活细胞激酶选择性分析. 可扩展的工作流显著增加了针对酶的药物发现工作的吞吐量.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 激酶是药物发现的关键目标,但实现抑制剂的细胞内选择性是具有挑战性的.
- 纳米BRET平台提供活细胞激酶选择性分析,但受到手动工作流程的限制.
- 高通量选对于识别有效的激酶抑制剂至关重要.
研究的目的:
- 开发一种可扩展和自动化的工作流程,用于活细胞激酶选择性分析.
- 为了提高NanoBRET平台的吞吐量,以实现更广泛的化合物选.
- 为了能够对酶抑制剂选择性的强有力的定量分析.
主要方法:
- 实施液体处理的自动化和声学分配.
- 适应NanoBRET平台用于高通量选.
- 复合物的分析对活细胞中的192个全长蛋白激酶进行了分析.
主要成果:
- 与手动液体处理相比,大幅提高吞吐量.
- 启用了对较大的化合物库与广泛的激酶进行分析.
- 实现了支持定量激酶选择性分析的统计稳定性.
结论:
- 自动化的NanoBRET工作流显著提高了激酶抑制剂选能力.
- 这种可扩展的方法促进了针对酶的更全面的药物发现工作.
- 优化的工作流支持选择性激酶抑制剂的有效识别.
