通过在线混合使核酸的水友相互作用染色学中大容量注射成为可能.
Joshka Verduin1,2, Luca Tutiš1,2, Antonia Kritsima2,3
1Department of Chemistry and Pharmaceutical Sciences, Division of BioAnalytical Chemistry, Amsterdam Institute of Molecular and Life Sciences (AIMMS), Vrije Universiteit Amsterdam, Amsterdam, Netherlands.
可以克服水友交互色谱 (HILIC) 与治疗性寡核酸 (ONs) 的挑战. 一个直线混合器有效地减轻突破和峰值分裂在大量注入ONs在水溶剂.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 染色体学 染色体学是什么
- 生物制药学分析
背景情况:
- 治疗性寡核酸 (ON) 是极极的,通常溶于水溶液中.
- 水友相互作用色谱 (HILIC) 适用于ON分析,但由于溶剂不匹配而面临挑战.
- 在HILIC中溶剂不匹配可能导致突破和峰值分裂,影响分离性能.
研究的目的:
- 调查样品溶剂成分和注射量对核基和ONs的HILIC分离的影响.
- 评估在线混合机在缓解HILIC中的突破和峰值分裂方面的有效性.
- 优化HILIC方法用于大量注射治疗性寡核酸.
主要方法:
- 使用同位素和梯度HILIC分析了核基和寡核酸混合物.
- 样品的溶剂成分 (水的百分比) 和注射量各不相同.
- 在注射器和HILIC柱之间使用直线混合器,以评估其对峰值形状和突破的影响.
主要成果:
- 高水分注射溶剂 (例如90%的水) 导致峰值扩大和变形,由较大的注射量加剧.
- 在梯度HILIC中,在30%的水中大量注射 (高达20μL) 的ONs没有显示性能损失.
- 在100%的水中注射ONs导致严重的峰值扭曲和突破2μL以上,但在线混合器可以在没有问题的情况下注射高达40μL.
结论:
- 样品溶剂成分和注射量显著影响ONs的HILIC性能.
- 在线混合是一种有价值的工具,可以在HILIC中进行大量注射,特别是对于高度水性样品.
- 使用直线混合开发的方法成功分析了一种制药抗意义寡核酸 (ASO),包括轻微杂质.
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