针对代漂白的优化工作流程扩展了高度自光临床样本的多重性成像
Aleksandra Lunich1, Andrea J Radtke2, Margaret Williams1
1Critical Care Medicine and Pulmonary Branch, National Heart, Lung and Blood Institute, National Institutes of Health.
Journal of visualized experiments : JoVE
|July 28, 2025
概括
这项研究优化了成像技术,以分析受非结核性真菌菌菌 (NTM) 疾病影响的肺组织中的免疫反应,为宿主病理提供了新的见解. 改进的方法可以对具有挑战性的临床样本进行详细分析,以更好地了解NTM肺部疾病.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 病理学 病理学 病理学
- 微生物学 微生物学
背景情况:
- 非结核菌菌 (NTM) 肺部疾病的患病率在全球范围内正在上升.
- 在NTM疾病中明显的肺损伤模式缺乏详细的实地宿主反应特征.
- 了解宿主免疫细胞反应对于NTM肺病病理学至关重要.
研究的目的:
- 从NTM疾病患者的肺组织中深入表型免疫细胞群.
- 为了比较NTM肺病与结核肺病 (TB) 的宿主反应.
- 优化多重成像技术,以挑战FFPE肺组织.
主要方法:
- 修改的代漂白扩展多重复合性 (IBEX) 图像,应用于FFPE肺组织.
- 开发了光辐射和抗原检索协议,以减少老化样本中的自光.
- 设计的抗体面板解决了多重成像的交叉反应和信号对噪声问题.
主要成果:
- 成功优化IBEX用于高自发光FFPE肺组织.
- 在NTM和结核病肺病中实现了免疫细胞的高分辨率全幻灯片成像.
- 在具有挑战性的临床样本上展示了多重成像工作流程.
结论:
- 开发的工作流允许在NTM肺部疾病中对免疫细胞进行详细的定量成像.
- 这种方法克服了FFPE肺组织中自发光的挑战.
- 这些技术广泛适用于光成像的各种样品类型.
